ซาซาวา

ต้นกำเนิดของโครมาโตกราฟี

โครมาโทกราฟีหรือที่รู้จักกันในชื่อ "การวิเคราะห์โครมาโตกราฟี" "โครมาโตกราฟี" เป็นวิธีการแยกและการวิเคราะห์ ซึ่งมีการใช้งานที่หลากหลายมากในเคมีวิเคราะห์ เคมีอินทรีย์ ชีวเคมี และสาขาอื่นๆ

ผู้ก่อตั้งโครมาโทกราฟีคือ M.Tsvetter นักพฤกษศาสตร์ชาวรัสเซียในปี 1906 นักพฤกษศาสตร์ชาวรัสเซีย Zvetter ตีพิมพ์ผลการทดลองของเขา: เพื่อแยกเม็ดสีพืช เขาได้เทสารสกัดปิโตรเลียมอีเทอร์ที่มีเม็ดสีพืชลงในหลอดแก้วที่บรรจุผงแคลเซียมคาร์บอเนต และชะด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์จากบนลงล่างเนื่องจากเม็ดสีที่ต่างกันมีความสามารถในการดูดซับบนพื้นผิวของอนุภาคแคลเซียมคาร์บอเนตที่แตกต่างกัน เมื่อผ่านกระบวนการชะล้าง เม็ดสีที่ต่างกันจะเคลื่อนตัวลงไปด้วยความเร็วที่ต่างกัน ทำให้เกิดแถบสีที่ต่างกันส่วนประกอบของเม็ดสีถูกแยกออกจากกันเขาตั้งชื่อวิธีแยกโครมาโตกราฟีนี้ว่า
ภาพที่ 1
การแสดงแผนผังการทดลองแยกเม็ดสีใบพืช
ด้วยการพัฒนาวิธีการแยกอย่างต่อเนื่อง ทำให้สารที่ไม่มีสีกลายเป็นเป้าหมายของการแยกมากขึ้นเรื่อยๆ โครมาโตกราฟีก็ค่อยๆ สูญเสียความหมายของ "สี" ไป แต่ชื่อนี้ยังคงใช้อยู่ในปัจจุบัน
การจำแนกประเภทโครมาโตกราฟี
สาระสำคัญของโครมาโตกราฟีคือกระบวนการที่โมเลกุลที่จะแยกออกจะถูกแบ่งพาร์ติชันและสมดุลระหว่างเฟสที่อยู่นิ่งและเฟสเคลื่อนที่สสารต่างๆ จะถูกแบ่งส่วนที่แตกต่างกันระหว่างสองเฟส ซึ่งทำให้พวกมันเคลื่อนที่ด้วยความเร็วที่แตกต่างกันตามเฟสเคลื่อนที่ด้วยการเคลื่อนที่ของเฟสเคลื่อนที่ ส่วนประกอบต่างๆ ในส่วนผสมจะถูกแยกออกจากกันในเฟสที่อยู่นิ่งขึ้นอยู่กับกลไกสามารถแบ่งได้เป็นหลายประเภท
1 ตามการจำแนกสถานะทางกายภาพสองเฟส
เฟสเคลื่อนที่: แก๊สโครมาโตกราฟี, โครมาโตกราฟีของเหลว, โครมาโตกราฟีของไหลวิกฤตยิ่งยวด
เฟสคงที่: ก๊าซ-ของแข็ง, ก๊าซ-ของเหลว;ของเหลว-ของแข็ง, ของเหลว-ของเหลว
2 ตามรูปแบบการจำแนกเฟสนิ่ง
คอลัมน์โครมาโตกราฟี: โครมาโตกราฟีคอลัมน์แบบอัดแน่น, โครมาโตกราฟีคอลัมน์แบบคาปิลลารี, โครมาโตกราฟีคอลัมน์แบบไมโครแพ็ค, โครมาโตกราฟีแบบเตรียมการ
โครมาโตกราฟีแบบระนาบ: โครมาโตกราฟีแบบกระดาษ, โครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง, โครมาโตกราฟีแบบเมมเบรนเมมเบรน
3 จำแนกตามกลไกการแยก
โครมาโตกราฟีแบบดูดซับ: ส่วนประกอบต่างๆ จะถูกแยกออกตามความสามารถในการดูดซับและการกำจัดดูดซับบนตัวดูดซับ
พาร์ทิชันโครมาโทกราฟี: ส่วนประกอบต่างๆ จะถูกแยกออกจากกันตามความสามารถในการละลายในตัวทำละลาย
โครมาโตกราฟีแบบแยกโมเลกุล: ตามขนาดของขนาดโมเลกุลของการแยก ln โครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออน: ส่วนประกอบต่าง ๆ ของความสัมพันธ์สำหรับการแยกเรซินแลกเปลี่ยนไอออน
Affinity chromatography: การแยกโดยใช้ความสัมพันธ์เฉพาะระหว่างโมเลกุลขนาดใหญ่ทางชีววิทยา
อิเล็กโทรโฟรีซิสของเส้นเลือดฝอย: ส่วนประกอบถูกแยกออกตามความแตกต่างในการเคลื่อนที่และ/หรือพฤติกรรมของการแบ่งพาร์ติชัน
โครมาโทกราฟีแบบไครัลใช้สำหรับการแยกและการวิเคราะห์ยาไครัล ซึ่งสามารถแบ่งออกเป็น 3 ประเภท ได้แก่ วิธีรีเอเจนต์การทำปฏิกิริยาไครัลวิธีการเติมเฟสเคลื่อนที่ของไครัลวิธีการแก้ไขเฟสนิ่งของไครัล
คำศัพท์พื้นฐานสำหรับโครมาโตกราฟี
เส้นโค้งที่ได้จากการวางแผนสัญญาณการตอบสนองของส่วนประกอบหลังจากการตรวจจับการแยกโครมาโทกราฟีเทียบกับเวลาเรียกว่า โครมาโตกราฟี

รูปภาพ2

พื้นฐาน:ภายใต้สภาวะโครมาโตกราฟีบางประการ เส้นโค้งของสัญญาณที่เกิดขึ้นเมื่อเฟสเคลื่อนที่เท่านั้นที่ผ่านระบบเครื่องตรวจจับเรียกว่าเส้นพื้นฐาน ดังที่แสดงในเส้น otเมื่อสภาวะการทดลองคงที่ เส้นฐานจะเป็นเส้นขนานกับแกนนอนเส้นฐานจะสะท้อนถึงเสียงของอุปกรณ์ ซึ่งส่วนใหญ่เป็นเครื่องตรวจจับ เมื่อเวลาผ่านไป

ความสูงสูงสุด:ระยะห่างแนวตั้งระหว่างจุดพีคของโครมาโตกราฟีและเส้นพื้นฐาน แสดงด้วย h ดังที่แสดงในเส้น AB '

ความกว้างของภูมิภาค:ความกว้างของขอบเขตของพีคของโครมาโตกราฟีเกี่ยวข้องโดยตรงกับประสิทธิภาพในการแยกสารมีสามวิธีในการอธิบายความกว้างพีคของโครมาโตกราฟี: ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน σ, ความกว้างพีค W และ FWHM W1/2

ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (σ) :σ คือระยะห่างครึ่งหนึ่งระหว่างจุดเปลี่ยนเว้าสองจุดบนเส้นโค้งการกระจายปกติ และค่า σ บ่งบอกถึงระดับการกระจายตัวของส่วนประกอบที่อยู่ห่างจากคอลัมน์ยิ่งค่า σ มากขึ้น ส่วนประกอบของน้ำทิ้งก็จะกระจายตัวมากขึ้น และผลการแยกตัวก็จะยิ่งแย่ลงในทางกลับกัน ส่วนประกอบของน้ำทิ้งจะมีความเข้มข้นและผลการแยกตัวก็ดี

ความกว้างสูงสุด W:จุดตัดบนทั้งสองด้านของพีคของโครมาโตกราฟีถูกใช้เป็นเส้นสัมผัสกัน และจุดตัดบนเส้นฐานเรียกว่าความกว้างของพีค หรือความกว้างของเส้นพื้นฐาน ซึ่งสามารถแสดงเป็น W ดังแสดงในรูปที่ IJตามหลักการของการแจกแจงแบบปกติ ความสัมพันธ์ระหว่างความกว้างสูงสุดกับส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสามารถพิสูจน์ได้ว่าเป็น W=4σ

ส1/2:ความกว้างสูงสุดที่ครึ่งหนึ่งของความสูงสูงสุดเรียกว่า FWHM ดังที่แสดงสำหรับระยะห่างของ GHW1/2=2.355σ, W=1.699W1/2

W1/2, W ทั้งคู่ได้มาจาก σ และใช้ในการคำนวณพื้นที่พีค นอกเหนือจากการวัดเอฟเฟกต์ของคอลัมน์การวัด FWHM สะดวกกว่าและใช้บ่อยที่สุด

สรุปโดยย่อ

จากกราฟการไหลออกของพีคของโครมาโตกราฟี คุณสามารถบรรลุวัตถุประสงค์ต่อไปนี้ได้:

ก การวิเคราะห์เชิงคุณภาพดำเนินการตามค่าการคงอยู่ของพีคโครมาโทกราฟี

b การวิเคราะห์เชิงปริมาณโดยอิงตามพื้นที่หรือพีคของพีคโครมาโตกราฟี

C. ประสิทธิภาพการแยกของคอลัมน์ได้รับการประเมินตามค่าการกักเก็บและความกว้างพีคของพีคโครมาโตกราฟี

สูตรการคำนวณที่เกี่ยวข้องกับโครมาโทกราฟี

1. มูลค่าการรักษา

ค่าการกักเก็บเป็นพารามิเตอร์ที่ใช้อธิบายระดับที่ส่วนประกอบตัวอย่างจะคงอยู่ในคอลัมน์ และใช้เป็นตัวบ่งชี้ลักษณะเฉพาะของโครมาโตกราฟีวิธีการแสดงมีดังนี้:

เวลาการเก็บรักษา tR

เวลาแห่งความตายtM

ปรับเวลาการเก็บรักษา tR'=ทีอาร์-tM

(เวลาทั้งหมดที่อยู่ในระยะหยุดนิ่ง)

ปริมาณการเก็บรักษา

วีอาร์=ทีอาร์*F. (ไม่ขึ้นกับความเร็วเฟสเคลื่อนที่)

ปริมาณที่ตายแล้ว

VM=tM*Fc

(พื้นที่ที่เฟสหยุดนิ่งไม่ถูกครอบครองในเส้นทางการไหลจากหัวฉีดไปยังเครื่องตรวจจับ)

ปรับปริมาณการกักเก็บ VR'=t'R*เอฟซี

2. มูลค่าการรักษาสัมพัทธ์
ค่าการเก็บรักษาสัมพัทธ์หรือที่เรียกว่าปัจจัยการแยก อัตราส่วนค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งส่วน หรือปัจจัยความจุสัมพัทธ์ คืออัตราส่วนของเวลาการเก็บรักษา (ปริมาตร) ที่ปรับเปลี่ยนของส่วนประกอบที่ทดสอบต่อเวลาการเก็บรักษา (ปริมาตร) ที่ปรับแล้วของมาตรฐานภายใต้สภาวะโครมาโทกราฟีบางอย่าง

ภาพที่ 3

ค่ากักเก็บสัมพัทธ์ถูกใช้เพื่อกำจัดอิทธิพลของสภาวะการทำงานบางอย่าง เช่น อัตราการไหลและการสูญเสียการตรึงต่อค่ากักเก็บมาตรฐานในค่าการกักเก็บสัมพัทธ์สามารถเป็นส่วนประกอบในตัวอย่างที่ทดสอบหรือสารประกอบที่เติมเทียม
3. ดัชนีการเก็บรักษา
ดัชนีการกักเก็บคือดัชนีการกักเก็บของสาร i ที่จะทดสอบในสารละลายคงที่ X โดยเลือก n-อะเลน 2 ตัวเป็นสารอ้างอิง โดยตัวหนึ่งมีหมายเลขคาร์บอน N และอีกตัวมี N+nเวลากักเก็บที่ปรับแล้วคือ t 'r (N) และ t 'r (N+n) ตามลำดับ เพื่อให้เวลากักเก็บที่ปรับแล้ว t 'r (i) ของสาร i ที่จะทดสอบอยู่ระหว่างเวลาเหล่านั้นพอดี กล่าวคือ เสื้อ (N)

ภาพที่ 4

ดัชนีการเก็บรักษาสามารถคำนวณได้ดังนี้

ภาพที่ 5

4. ปัจจัยความจุ (k)
ที่สภาวะสมดุล อัตราส่วนของมวลของส่วนประกอบในเฟสที่อยู่นิ่งต่อเฟสเคลื่อนที่ (m) เรียกว่าปัจจัยความจุสูตรมีดังนี้:
ภาพที่6
5、สัมประสิทธิ์การแบ่งส่วน (K) ในสภาวะสมดุล อัตราส่วนของความเข้มข้นของส่วนประกอบในเฟสที่อยู่นิ่งต่อเฟสเคลื่อนที่ (m) เรียกว่าสัมประสิทธิ์การแบ่งส่วนสูตรมีดังนี้
ภาพที่ 7
ความสัมพันธ์ระหว่าง K และ k:

มันสะท้อนถึงประเภทของคอลัมน์และคุณสมบัติที่สำคัญของโครงสร้างปม
ภาพที่ 8

สรุปโดยย่อ

ความสัมพันธ์ระหว่างค่าการเก็บรักษาและปัจจัยด้านความจุและค่าสัมประสิทธิ์พาร์ติชัน:

การแยกโครมาโตกราฟีขึ้นอยู่กับความแตกต่างในความสามารถในการดูดซับหรือการละลายของแต่ละส่วนประกอบในตัวอย่างสัมพัทธ์คงที่ ซึ่งสามารถแสดงได้ในเชิงปริมาณด้วยขนาดของค่าสัมประสิทธิ์พาร์ติชัน K (หรือค่าปัจจัยความจุ k)
ส่วนประกอบที่มีความสามารถในการดูดซับหรือละลายได้ดีมีค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งส่วนขนาดใหญ่ (หรือปัจจัยด้านความจุ) และมีเวลาเก็บรักษานานในทางกลับกัน ส่วนประกอบที่มีการดูดซับหรือความสามารถในการละลายต่ำจะมีค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งส่วนน้อยและมีเวลากักเก็บสั้น
ทฤษฎีพื้นฐานของโครมาโตกราฟี
1. ทฤษฎีถาด
(1) หยิบยก -- ทฤษฎีอุณหพลศาสตร์
เริ่มต้นด้วยโมเดลแผ่นหอคอยที่เสนอโดย Martin และ Synge
คอลัมน์การแยกส่วน: ในถาดหลายครั้งของสมดุลของก๊าซและของเหลวตามจุดเดือดของการแยกที่แตกต่างกัน
คอลัมน์: ส่วนประกอบต่างๆ ได้รับการปรับสมดุลโดยหลายพาร์ติชันระหว่างสองเฟส และแยกออกจากกันตามค่าสัมประสิทธิ์พาร์ติชันที่ต่างกัน
(2) สมมติฐาน
(1) มีถาดหลายถาดในคอลัมน์ และส่วนประกอบสามารถเข้าถึงสมดุลการกระจายอย่างรวดเร็วภายในช่วงถาด (นั่นคือ ความสูงของถาด)
(2) เฟสเคลื่อนที่เข้าสู่คอลัมน์ ไม่ต่อเนื่อง แต่เต้นเป็นจังหวะ กล่าวคือ แต่ละตอนเป็นปริมาตรคอลัมน์
(3) เมื่อเพิ่มตัวอย่างลงในแต่ละแผ่นคอลัมน์ การแพร่กระจายของตัวอย่างตามแกนคอลัมน์อาจถูกละเลย
(4) ค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งพาร์ติชันจะเท่ากันบนถาดทั้งหมด โดยไม่ขึ้นกับจำนวนของส่วนประกอบนั่นคือค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งพาร์ติชันจะคงที่ในแต่ละแท็บ
(3) หลักการ
ภาพที่ 9
แผนผังของทฤษฎีถาด
หากส่วนประกอบที่มีมวลต่อหน่วย เช่น m=1 (เช่น 1 มก. หรือ 1μg) ถูกเพิ่มลงในถาดหมายเลข 0 และหลังจากการกระจายสมดุล เนื่องจาก k=1 คือ ns=nm, nm=ns=0.5
เมื่อปริมาตรจาน (lΔV) ของก๊าซตัวพาเข้าสู่จาน 0 ในรูปของการเต้นเป็นจังหวะ ก๊าซตัวพาที่มีส่วนประกอบ nm ในเฟสก๊าซจะถูกผลักไปที่จาน 1 ในเวลานี้ ส่วนประกอบ ns ในเฟสของเหลวของจาน 0 และส่วนประกอบนาโนเมตรในเฟสก๊าซของแผ่นที่ 1 จะถูกกระจายใหม่ระหว่างสองเฟสดังนั้น จำนวนส่วนประกอบทั้งหมดที่มีอยู่ในจาน 0 คือ 0.5 โดยเฟสของก๊าซและของเหลวอยู่ที่แต่ละเฟส 0.25 และจำนวนรวมที่อยู่ในจาน 1 เท่ากับ 0.5 เช่นกันเฟสของก๊าซและของเหลวก็อยู่ที่ 0.25 เช่นกัน
กระบวนการนี้จะเกิดขึ้นซ้ำทุกครั้งที่ก๊าซตัวพาปริมาตรเพลตใหม่ถูกเต้นเป็นจังหวะเข้าไปในคอลัมน์ (ดูตารางด้านล่าง)
ภาพที่ 10
(4) สมการเส้นโค้งการไหลออกของโครมาโตกราฟี
ภาพที่ 11
σ คือค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน คือ เวลาคงอยู่ C คือความเข้มข้น ณ เวลาใดๆ
C คือความเข้มข้นของการฉีด ซึ่งก็คือจำนวนส่วนประกอบทั้งหมด (พื้นที่พีค A)

(5) พารามิเตอร์ประสิทธิภาพของคอลัมน์
ภาพที่ 12

ที่ค่าคงที่ tR ค่า W หรือ w 1/2 ยิ่งน้อยลง (นั่นคือ จุดสูงสุดที่แคบลง) จำนวนเพลททางทฤษฎี n ก็ยิ่งมากขึ้น ความสูงของเพลททางทฤษฎีก็จะยิ่งน้อยลง และประสิทธิภาพการแยกของคอลัมน์ก็จะยิ่งสูงขึ้นเช่นเดียวกับทฤษฎีถาดเนฟฟ์ที่มีประสิทธิผลดังนั้นจำนวนถาดตามทฤษฎีจึงเป็นดัชนีในการประเมินประสิทธิภาพของคอลัมน์

(5) ลักษณะและข้อบกพร่อง
> ข้อดี
ทฤษฎีถาดเป็นแบบกึ่งทดลองและอธิบายรูปร่างของเส้นโค้งการไหลออก
มีภาพประกอบแสดงกระบวนการแบ่งพาร์ติชันและการแยกส่วนประกอบ
มีการเสนอดัชนีเพื่อประเมินประสิทธิภาพของคอลัมน์
> ข้อจำกัด
ส่วนประกอบต่างๆ ไม่สามารถเข้าถึงสมดุลการกระจายตัวในสองระยะได้จริงๆ:
การแพร่กระจายตามยาวของส่วนประกอบในคอลัมน์ไม่สามารถละเลยได้:
ไม่ได้พิจารณาอิทธิพลของปัจจัยจลน์ต่างๆ ที่มีต่อกระบวนการถ่ายโอนมวล
ไม่สามารถอธิบายความสัมพันธ์ระหว่างเอฟเฟกต์ของคอลัมน์กับความเร็วการไหลของเฟสเคลื่อนที่ได้:
ยังไม่ชัดเจนว่าปัจจัยหลักใดที่ส่งผลต่อผลกระทบของคอลัมน์
ปัญหาเหล่านี้ได้รับการแก้ไขอย่างน่าพอใจในทฤษฎีอัตรา

2. ทฤษฎีอัตรา
ในปี 1956 VanDeemter นักวิชาการชาวดัตช์ และคณะซึมซับแนวคิดของทฤษฎีถาด และรวมปัจจัยจลน์ที่ส่งผลต่อความสูงของถาด หยิบยกทฤษฎีจลน์ของกระบวนการโครมาโทกราฟี - ทฤษฎีอัตรา และรับสมการ VanDeemterโดยถือว่ากระบวนการโครมาโตกราฟีเป็นกระบวนการที่ไม่สมดุลแบบไดนามิก และศึกษาอิทธิพลของปัจจัยจลน์ที่มีต่อการขยายจุดสูงสุด (เช่น ผลกระทบของคอลัมน์)
ต่อมา กิดดิงส์ และสไนเดอร์ และคณะเสนอสมการอัตราโครมาโตกราฟีของเหลว (ได้แก่ สมการกิดดิงส์) โดยใช้สมการแวนดีมเตอร์ (ต่อมาเรียกว่าสมการอัตราโครมาโตกราฟีแบบแก๊ส) และตามค่าความแตกต่างคุณสมบัติระหว่างของเหลวและก๊าซ
(1) สมการแวน ดีมเตอร์

ภาพที่ 13
ภาพที่ 14

โดยที่: H: คือความสูงของกระดาน
A: สัมประสิทธิ์ของคำการแพร่กระจายของลมหมุน
B: ค่าสัมประสิทธิ์ของระยะการแพร่กระจายของโมเลกุล
C: สัมประสิทธิ์ของเทอมความต้านทานการถ่ายโอนมวล

(2) สมการกิดดิงส์
ภาพที่ 15
การวิเคราะห์เชิงปริมาณและเชิงคุณภาพ
(1) การวิเคราะห์เชิงคุณภาพ
การวิเคราะห์โครมาโทกราฟีเชิงคุณภาพคือการหาสารประกอบที่แสดงโดยพีคโครมาโทกราฟีแต่ละอันเนื่องจากสารต่างๆ มีค่ากักเก็บที่แน่นอนภายใต้สภาวะโครมาโทกราฟีบางอย่าง ค่ากักเก็บจึงสามารถใช้เป็นดัชนีเชิงคุณภาพได้วิธีการเชิงคุณภาพโครมาโตกราฟีต่างๆ ในปัจจุบันอิงตามค่าการคงอยู่
อย่างไรก็ตาม สารที่แตกต่างกันอาจมีค่าการกักเก็บที่คล้ายกันหรือเหมือนกันภายใต้สภาวะโครมาโทกราฟีที่เหมือนกัน กล่าวคือ ค่ากักเก็บนั้นไม่ได้จำกัดอยู่เพียงเท่านั้นดังนั้นจึงเป็นการยากที่จะระบุลักษณะเฉพาะของตัวอย่างที่ไม่ทราบแน่ชัดโดยพิจารณาจากค่าการเก็บรักษาเพียงอย่างเดียวหากบนพื้นฐานของการทำความเข้าใจแหล่งที่มา ธรรมชาติ และวัตถุประสงค์ของตัวอย่าง สามารถตัดสินเบื้องต้นเกี่ยวกับองค์ประกอบของตัวอย่างได้ และวิธีการต่อไปนี้สามารถใช้เพื่อกำหนดสารประกอบที่แสดงโดยพีคของโครมาโตกราฟี
1. การควบคุมคุณภาพโดยใช้สารบริสุทธิ์
ภายใต้เงื่อนไขทางโครมาโตกราฟีบางอย่าง สิ่งที่ไม่รู้จักจะมีเวลาคงอยู่ที่กำหนดไว้เท่านั้นดังนั้น สิ่งที่ไม่ทราบสามารถระบุได้ในเชิงคุณภาพโดยการเปรียบเทียบเวลากักเก็บของสารบริสุทธิ์ที่ทราบภายใต้สภาวะโครมาโตกราฟีเดียวกันกับเวลากักเก็บของสารที่ไม่ทราบถ้าทั้งสองเหมือนกัน สารที่ไม่รู้จักอาจเป็นสารบริสุทธิ์ที่ทราบมิฉะนั้น สิ่งไม่รู้ก็ไม่ใช่สสารบริสุทธิ์
วิธีการควบคุมสารบริสุทธิ์ใช้ได้เฉพาะกับสารที่ไม่ทราบซึ่งมีทราบองค์ประกอบ มีองค์ประกอบค่อนข้างง่าย และทราบว่ามีสารบริสุทธิ์
2. วิธีมูลค่าการเก็บรักษาสัมพัทธ์
ค่าการกักเก็บสัมพัทธ์ α หมายถึงการปรับระหว่างส่วนประกอบ i และวัสดุอ้างอิง อัตราส่วนของค่าการกักเก็บ:

ก10

จะเปลี่ยนแปลงเฉพาะกับการเปลี่ยนแปลงของอุณหภูมิคงที่และคอลัมน์เท่านั้น และไม่เกี่ยวข้องกับสภาพการทำงานอื่นๆ

ที่เฟสคงที่และอุณหภูมิคอลัมน์ ค่าการกักเก็บที่ปรับแล้วของส่วนประกอบ i และสารอ้างอิง s จะถูกวัดตามลำดับ จากนั้นจึงคำนวณตามสูตรข้างต้นค่าการเก็บรักษาสัมพัทธ์ที่ได้รับสามารถเปรียบเทียบในเชิงคุณภาพกับค่าที่สอดคล้องกันในวรรณกรรมได้
3 เติมสารที่ทราบเพื่อเพิ่มวิธีเพิ่มความสูงสูงสุด
เมื่อมีส่วนประกอบจำนวนมากในตัวอย่างที่ไม่รู้จัก พีคของโครมาโตกราฟีที่ได้รับจะมีความหนาแน่นเกินกว่าจะระบุได้ง่ายด้วยวิธีการข้างต้น หรือเมื่อตัวอย่างที่ไม่รู้จักถูกนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์รายการที่ระบุเท่านั้น
"ขั้นแรกจะมีการสร้างโครมาโตแกรมของตัวอย่างที่ไม่รู้จัก จากนั้นจึงได้โครมาโตแกรมเพิ่มเติมโดยการเติมสารที่รู้จักลงในตัวอย่างที่ไม่รู้จัก"ส่วนประกอบที่มีความสูงสูงสุดเพิ่มขึ้นสามารถทราบได้จากสารดังกล่าว
4. คงไว้ซึ่งวิธีการเชิงคุณภาพของดัชนี
ดัชนีการกักเก็บแสดงถึงพฤติกรรมการกักเก็บสารบนสารยึดติด และปัจจุบันเป็นดัชนีคุณภาพที่ใช้กันอย่างแพร่หลายและเป็นที่ยอมรับในระดับสากลใน GCมีข้อดีคือสามารถทำซ้ำได้ดี มีมาตรฐานสม่ำเสมอ และมีค่าสัมประสิทธิ์อุณหภูมิต่ำ
ดัชนีการกักเก็บจะเกี่ยวข้องกับคุณสมบัติของเฟสคงที่และอุณหภูมิของคอลัมน์เท่านั้น แต่ไม่เกี่ยวข้องกับเงื่อนไขการทดลองอื่นๆความแม่นยำและความสามารถในการทำซ้ำนั้นยอดเยี่ยมมากตราบใดที่อุณหภูมิของคอลัมน์เท่ากับอุณหภูมิของเฟสคงที่ สามารถใช้ค่าวรรณกรรมเพื่อระบุตัวตนได้ และไม่จำเป็นต้องใช้วัสดุบริสุทธิ์ในการเปรียบเทียบ
(2) การวิเคราะห์เชิงปริมาณ
พื้นฐานสำหรับการหาปริมาณโครมาโตกราฟี:
หน้าที่ของการวิเคราะห์เชิงปริมาณคือการหาส่วนประกอบนับร้อยในตัวอย่างที่ผสม
เนื้อหาที่เป็นเศษส่วนการหาปริมาณโครมาโตกราฟีขึ้นอยู่กับสิ่งต่อไปนี้: เมื่อสภาวะการทำงานสอดคล้องกัน

มวล (หรือความเข้มข้น) ของส่วนประกอบที่วัดได้ถูกกำหนดโดยสัญญาณตอบสนองที่ได้รับจากเครื่องตรวจจับ
มันเป็นสัดส่วนกล่าวคือ:

ก11

พื้นฐานสำหรับการหาปริมาณโครมาโตกราฟี:
หน้าที่ของการวิเคราะห์เชิงปริมาณคือการหาส่วนประกอบนับร้อยในตัวอย่างที่ผสม
เนื้อหาที่เป็นเศษส่วนการหาปริมาณโครมาโตกราฟีขึ้นอยู่กับสิ่งต่อไปนี้: เมื่อสภาวะการทำงานสอดคล้องกัน
มวล (หรือความเข้มข้น) ของส่วนประกอบที่วัดได้ถูกกำหนดโดยสัญญาณตอบสนองที่ได้รับจากเครื่องตรวจจับ
มันเป็นสัดส่วนกล่าวคือ:

1. วิธีการวัดพื้นที่พีค
พื้นที่พีคคือข้อมูลเชิงปริมาณพื้นฐานที่ได้จากโครมาโตแกรม และความแม่นยำของการวัดพื้นที่พีคจะส่งผลโดยตรงต่อผลลัพธ์เชิงปริมาณใช้วิธีการวัดที่แตกต่างกันสำหรับพีคของโครมาโตกราฟีที่มีรูปร่างพีคต่างกัน
เป็นการยากที่จะหาค่าที่แน่นอนของฤดูหนาวในการวิเคราะห์เชิงปริมาณ:
ในด้านหนึ่งเนื่องจากความยากลำบากในการวัดปริมาตรการฉีดสัมบูรณ์อย่างแม่นยำ ในทางกลับกัน
พื้นที่จุดสูงสุดขึ้นอยู่กับสภาวะของโครมาโทกราฟี และควรรักษาแถบโครมาโตกราฟีไว้เมื่อมีการวัดค่า
เป็นไปไม่ได้หรือสะดวกในการทำสิ่งเดียวกันและถึงแม้ว่าคุณจะสามารถทำให้มันถูกต้องได้ก็ตาม
ค่าที่แน่นอนเนื่องจากไม่มีมาตรฐานแบบครบวงจรและไม่สามารถนำมาใช้โดยตรงได้
ภาพที่ 18

2.ปัจจัยการแก้ไขเชิงปริมาณ

คำจำกัดความของปัจจัยการแก้ไขเชิงปริมาณ: จำนวนส่วนประกอบที่เข้าสู่เครื่องตรวจจับ (m)
อัตราส่วนของพื้นที่พีคของโครมาโตกราฟี (A) หรือความสูงพีค () คือค่าคงที่ตามสัดส่วน (,
ค่าคงที่สัดส่วนเรียกว่าปัจจัยการแก้ไขสัมบูรณ์สำหรับส่วนประกอบ

ก12
เป็นการยากที่จะหาค่าที่แน่นอนของฤดูหนาวในการวิเคราะห์เชิงปริมาณ:
ในด้านหนึ่งเนื่องจากความยากลำบากในการวัดปริมาตรการฉีดสัมบูรณ์อย่างแม่นยำ ในทางกลับกัน
พื้นที่จุดสูงสุดขึ้นอยู่กับสภาวะของโครมาโทกราฟี และควรรักษาแถบโครมาโตกราฟีไว้เมื่อมีการวัดค่า
เป็นไปไม่ได้หรือสะดวกในการทำสิ่งเดียวกันและถึงแม้ว่าคุณจะสามารถทำให้มันถูกต้องได้ก็ตาม
ค่าที่แน่นอนเนื่องจากไม่มีมาตรฐานแบบครบวงจรและไม่สามารถนำมาใช้โดยตรงได้
ก13
นั่นคือปัจจัยการแก้ไขสัมพัทธ์ของส่วนประกอบคือส่วนประกอบและวัสดุอ้างอิง s
อัตราส่วนของปัจจัยการแก้ไขสัมบูรณ์

ก14
จะเห็นได้ว่าปัจจัยการแก้ไขสัมพัทธ์คือเมื่อคุณภาพของส่วนประกอบเทียบกับมาตรฐาน
เมื่อสาร s เท่ากัน พื้นที่พีคของวัสดุอ้างอิงคือพื้นที่พีคของส่วนประกอบ
หลายรายการ.ถ้าองค์ประกอบบางตัวมีมวล m และพื้นที่พีค A แล้วจะเป็นจำนวน f'A
ค่าจะเท่ากับพื้นที่พีคของวัสดุอ้างอิงที่มีมวลกล่าวอีกนัยหนึ่ง
ด้วยปัจจัยการแก้ไขสัมพัทธ์ ทำให้สามารถแยกพื้นที่จุดสูงสุดของแต่ละส่วนประกอบออกได้
แปลงเป็นพื้นที่พีคของวัสดุอ้างอิงเท่ากับมวลแล้วจึงเป็นอัตราส่วน
มาตรฐานเป็นหนึ่งเดียวนี่คือวิธีมาตรฐานในการหาเปอร์เซ็นต์ของแต่ละองค์ประกอบ
พื้นฐานของปริมาณ
วิธีการหาปัจจัยการแก้ไขสัมพัทธ์: เปรียบเทียบค่าปัจจัยการแก้ไขสัมพัทธ์กับความเป็นอยู่เท่านั้น
การวัดจะเกี่ยวข้องกับมาตรฐานและประเภทของเครื่องตรวจจับ แต่จะเกี่ยวข้องกับแถบการทำงานด้วย
มันไม่สำคัญดังนั้นจึงสามารถดึงค่ามาจากข้อมูลอ้างอิงในวรรณกรรมได้ถ้าข้อความ
หากคุณไม่พบมูลค่าที่ต้องการในข้อเสนอ คุณสามารถกำหนดได้ด้วยตัวเองวิธีการกำหนด
วิธีการ: สารที่ตรวจวัดจำนวนหนึ่ง วัสดุอ้างอิงที่เลือกไว้สิบชนิด → ทำให้มีความเข้มข้นที่แน่นอน
วัดพื้นที่พีคของโครมาโตกราฟี A และ ณ ของส่วนประกอบทั้งสอง
นั่นคือสูตร

ก15
3. วิธีการคำนวณเชิงปริมาณ
(1) วิธีการทำให้เป็นมาตรฐานของพื้นที่
ผลรวมของเศษส่วนที่ไม่มีจุดสูงสุดทั้งหมดคำนวณเป็น 100% สำหรับการหาปริมาณ
วิธีการนี้เรียกว่าการทำให้เป็นมาตรฐานสูตรการคำนวณมีดังนี้:
ก16
โดยที่ P, % คือเปอร์เซ็นต์ของส่วนประกอบที่ทดสอบA1, A2... A n คือองค์ประกอบ 1 พื้นที่จุดสูงสุดของ 1~n;f'1, f'2... f'n คือปัจจัยการแก้ไขสัมพัทธ์สำหรับส่วนประกอบ 1 ถึง n

(2) วิธีมาตรฐานภายนอก
วิธีการเปรียบเทียบเชิงปริมาณระหว่างสัญญาณตอบสนองของส่วนประกอบที่จะทดสอบในตัวอย่างกับส่วนประกอบบริสุทธิ์ที่จะทดสอบเป็นตัวควบคุม
(3) วิธีมาตรฐานภายใน
วิธีมาตรฐานภายในที่เรียกว่าวิธีการมาตรฐานภายในคือวิธีการเติมสารบริสุทธิ์จำนวนหนึ่งลงในสารละลายมาตรฐานของสารที่ทดสอบและสารละลายตัวอย่างเป็นมาตรฐานภายใน จากนั้นจึงวิเคราะห์และกำหนด
(3) วิธีการเติมมาตรฐาน
วิธีการเติมมาตรฐานหรือที่เรียกว่าวิธีการเติมภายในคือการเติม (△C) จำนวนหนึ่ง
มีการเพิ่มการอ้างอิงของสารทดสอบลงในสารละลายตัวอย่างที่จะทดสอบ และเติมการทดสอบในการทดสอบ
จุดสูงสุดของสารละลายตัวอย่างหลังจากสารมีค่าสูงกว่าค่าพีคของสารละลายตัวอย่างดั้งเดิม
การเพิ่มขึ้นของพื้นที่ (△A) ถูกนำมาใช้ในการคำนวณความเข้มข้นของสารในสารละลายตัวอย่าง
เนื้อหา (Cx)
ก17
โดยที่ Ax คือพื้นที่พีคของสารที่จะวัดในตัวอย่างดั้งเดิม
ภาพที่25
ภาพที่26
ภาพที่27


เวลาโพสต์: 27 มี.ค. 2023